②分离培养与鉴定

确诊需取上述病料接种巧克力琼脂或绵羊血琼脂，置5%CO2以达 37℃越夜培养。如有溶菌小菌落生长，应进一步作 CAMP 试验；检测脲酶活性及甘露醇发酵能力

→CAMP 无特异性，好多细菌都可以 一般作琼脂扩散试验或直接凝集试验鉴定分离株的血清型

③基因检测

预防与治疗

①采猪群血清作抗体检测，淘汰阳性猪，可建立净化猪群。

②同时注射灭活疫苗，某些国家已用此法消灭了此病。但此法费用高昂。

免疫预防应选用当地血清型的分离株，制成灭活疫苗就地使用，效果较佳。

③根据药敏试验的结果，选用敏感的抗生素可供猪群治疗之用，一般首选青霉素，但美、日等国发现，有 16%的菌株已对青霉素产生耐药性。

第三节 嗜血杆菌

①嗜血杆菌是一群酶系统不完全的革兰阴性杆菌，生长需要血液中的生长因子，尤其是 X 因子和 V 因子。常见的动物源嗜血杆菌有 6 种。

②嗜血杆菌存在于人和动物的呼吸道黏膜常分离自人和动物的各种病灶和分泌物。

③本属细菌引起的畜禽疫病在世界许多国家发现。

1.生物学性状

1.1 形态及染色（目前是依据遗传分类鉴定，而不是形态等）

①多为短杆状，也有呈球、杆状或长丝状等多形性，大小为 1.5×（0.3~0.4）um。多单个、也有短链排列。

②无鞭毛，无芽孢，新分离的致病菌株有荚膜。

③美蓝染色呈两极，革兰染色为阴性。

1.2 培养特性

①呼吸类型：

需氧或兼性厌氧；初次分离培养时供给 5%~10% CO2可促进生长

→怀疑它为嗜血杆菌时加入 XX

②生长温度：最适生长温度 37℃

③ 适宜 pH：7.6~7.8

④营养要求（很高）

V 因子：

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（1）为辅酶Ⅰ或辅酶Ⅱ[即烟碱腺嘌呤二核苷酸（NAD）或烟碱腺嘌呤二核苷胺磷酸（NADP）] ，是细菌呼吸过程中其递氢作用的脱氢辅酶。

（2）热不稳定

（3）血液中的 V 因子一般处于被抑制状态，血液加热后，抑制物被破坏，V 因子被释出。

X 因子：

（1）成分：血红蛋白中的血红素及其衍生物，含铁卟啉。

（2）热稳定，经 120℃ 30min 不被破坏。

巧克力培养基：

（1）将鲜血琼脂加热 75~80℃，5~15min，即制成该培养基

（2）该过程从细胞内释放了 NAD，同时失活对 NAD 的酶。

⑤生长表现：