3yt.org 微生物知识点(4)

外毒素→类毒素→抗毒素

3.4 衰退期

特点:①繁殖速度越来越慢,死亡菌数增多,活菌数减少

②死菌数超过繁殖数,但总菌数(包括活菌+死亡)并不下降

③形态变化显着,如细菌变长,肿胀,扭曲,染色不典型,难以辨认

不宜用陈旧的培养基作细菌的鉴定

第五节 细菌的人工培养

1.进行细菌培养目的

①细菌培养是微生物学研究和实践的重要技术,以此可培养,鉴定细菌

②病原菌的细菌学研究

③传染病的病原学诊断和治疗

④生物制品的制备和基因工程研究

补: 宠物→检测抗原 畜禽→检测抗体

前景 快速诊断+相应血清

人工培养细菌,除需要提供充足的营养物质使细菌获得生长繁殖所需的原料和能量

2.培养基

2.1 定义:人工配制的含有细菌生长繁殖所需的基质

使用之前应:将培养基 PH 调节至 7.2~7.6(中性偏碱)、灭菌、做好无菌检验

2.2 培养基种类

2.2.1 按营养组成分类

2.2.1.1 基础培养基

①含有细菌生长繁殖所需的基本营养成分,可供大多细菌培养用

②最常使用:普通肉汤培养基

2.2.1.2 营养培养基

①在基础培养基中加入葡萄糖,血液,血清,酵母浸膏等

需掌握:如临床培养巴氏杆菌→对应培养基

②最常使用:血琼脂平板

2.2.2 按培养基功能分类

①选择培养基 ②鉴别培养基 ③厌氧培养基

2.2.2.1 选择培养基

在培养基中加入某些化学物质,选择性地抑制某些细菌生长,有利用另一些细菌生长的培养基,以便从混杂多种细菌的样本中分离出所需细菌。如:麦康凯培养基→抑制 G+菌。

2.2.2.2 鉴别培养基

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在培养基中加入特定作用的底物和指示剂,用肉眼可以初步鉴别细菌。

如:糖发酵管,硫化氢管,伊红美苔培养基。

补:有时选择培养基与鉴别培养基没区别

2.2.2.3 厌氧培养基

专门用于培养厌氧菌的培养基,如:疱肉培养基

2.2.3 按物理性状分类

①液体培养基 ②半固体培养基 ③固体培养基

2.2.3.1 液体培养基

可供细菌分离纯化,菌落观察,生物活性检测及鉴定等。

2.2.3.2 半固体培养基

①液体培养基加入 0.5%琼脂

琼脂本身对细菌没有营养作用,只是一种赋形剂,其熔点为 98℃凝固点为 45℃,室温冷却后,是培养基凝成固体或半固体状态。

②可用于观察细菌的动力及菌种的短期保存。

2.2.3.3 固体培养基

液体培养基加入 1%~2%的琼脂

3.培养方法

①大多数细菌可以人工培养

②一般情况下,根据不同细菌,选择合适的培养基,最适 PH,温度(大多数病原菌最适温度为 37℃)和气体环境进行人工培养。

补:培养厌氧菌要特别制备厌氧培养基

4.细菌在培养基中生长状况(试验中细讲)

纯培养

①系统只在单一种类存在的状态下所进行的培养。

②纯培养最重要是在于微生物研究,方法是靠灭菌和分离,是由巴斯德和柯赫建立起来的。

③微生物学把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后代称为纯培养。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物,得到纯培养的过程称分离纯化。

5.菌种的保存

在人工环境下,使细菌的生长繁殖受限制,代谢处于休眠状态。

①要求:保存菌种时要尽量维持菌种的存活率(冻干),减少菌种的变异

②常用的保存方法 :

斜面低温保存法

半固体室温保存法

液体冻存法

真空冷冻干燥法