【病理变化】
患病动物的口腔、蹄部、乳房、咽喉、气管、支气管和胃黏膜可见到水疱、烂斑和溃疡,上面覆盖有黑棕色的痴块。
反刍动物真胃和大小肠黏膜可见出血性炎症。
心包膜有弥漫性及点状出血,心脏表面有灰白色或淡黄色的斑点或条纹,俗称“虎斑心”。
心肌松软似煮过的肉。
组织病理学检查可见皮肤的棘细胞肿大呈球形,间桥明显,渗出明显乃至溶解。
心肌细胞变性、坏死、溶解,其释放出有毒分解产物而使患病动物死亡。
【诊断】
根据流行病学、临床症状和病理剖检特点可做出初步诊断,确诊需要进行实验室诊断。
1.病毒分离鉴定
(1)病料采集:
通常采集新鲜的水疱皮或水疱液,采后加入等量pH7.6含10%胎牛血清的组织培养液;
也可从刚发过病的动物采集病料,一般采集血液或用食道探杯刮取咽喉-食道分泌物;
死亡动物则可采集淋巴结、骨髓、甲状腺或心肌等材料作为病料。
(2)分离鉴定:
病料制成20%的组织悬液,接种细胞培养物、未断乳乳鼠等实验动物。
口蹄疫病毒可在猪肾细胞、乳仓鼠肾细胞等细胞系中增殖并产生细胞病变,可致死7日龄内乳鼠,必要时可进一步通过血清学试验、聚合酶链式反应等检测、鉴定病毒。
2.分子生物学诊断
随着分子生物学技术的迅猛发展,口蹄疫的诊断技术也得到了快速发展,主要有核酸杂交、RT-PCR等技术,使口蹄疫的诊断更加简便、快捷、特异和敏感。
3.血清学试验
血清学试验常用于口蹄疫病毒毒型的鉴定,以便依据流行毒株的血清型选用同型口蹄疫疫苗,进行紧急免疫接种。
常用的血清学试验有补体结合试验(CFT)、(乳鼠病毒)中和试验(NT)、免疫扩散沉淀试验(IDPT)、荧光抗体技术等。
近年来,OIE推荐的间接夹心ELISA在国际贸易中广泛使用,在数小时内可获得试验结果。
因为免疫接种动物3ABC抗体呈阴性,而感染动物3ABC抗体则呈阳性,因此,可通过检测血清中口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC抗体,区分感染动物和免疫接种动物。
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4.动物接种试验
一般选2~7日龄纯系乳小鼠,于颈背部皮下接种病毒感染液
0.2 mL。接种小鼠通常于20~30h出现典型的口蹄疫症状,发病乳小鼠运动不灵活,用镊子夹住尾巴或四肢,常可发现其已失去知觉。随后四肢麻痹,呼吸迫促,最终死亡。
采集濒死期或新死乳小鼠的骨骼肌,研磨制成10%的病料悬液,供传代接种和鉴定用。也可选用豚鼠或乳兔进行试验接种。